Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:
بهزادیان نژاد قربان ، ستاری مرتضی ، ریاضی غلام حسین ، عطائی رمضان علی . تولید، استخراج و اندازه گیری فعالیت نوروتوکسین تیپ A کلستریدیوم بوتولینوم بر اساس پارامترهای کمی. تحقیقات نظام سلامت حکیم.
چکیده: (655 مشاهده)
هدف این تحقیق تعیین اثر توکسین تیپ A کلستریدیوم بوتولینوم بر رفتارهای موش آزمایشگاهی است. با اسیدی کردن محیط کشت 96 ساعته و رساندن pH آن به 3.5، رسوب تشکیل شد. سپس بوسیله سانتریفیوژ (10000 دور در دقیقه و به مدت 20 دقیقه و دمای (4°C رسوب حاصل جمع آوری گردید و سه بار با آب مقطر استریل شستشو داده شد. سپس به رسوب جمع آوری شده، بافر سیترات سدیم 0.1 مولار با5.5 pH= اضافه گردید.پس از 1 ساعت نگهداری در 25°C، سانتریفیوژ (10000 دور در دقیقه وبه مدت 20 دقیقه و دمای (4°C گردید. محلول رویی جدار و با سولفات آمونیوم به 70 درصد اشباع رسانده شد. پس از یک شب رسوب حاصل جدا و در بافر فسفات سدیم 0.1 مولار و 6.5 pH= حل گردید. به منظور خارج کردن سولفات آمونیوم در همین بافر دیالیز شد و در دمای 4°C نگهداری گردید. پس از آن غلظت پروتیین این محلول اندازه گیری و مشخص گردید که در هر میلی لیتر محلول 1 تا 2 میکروگرم پروتیین با خاصیت نوروتوکسین وجود دارد. سپس غلظت های مختلف این محلول در حجم های متفاوت (0.1، 0.2 ،0.3 و 0.5 میلی لیتر) بصورت داخل صفاقی به موش تزریق شد. به منظور تبدیل پارامترهای کیفی به پارامترهای کمی و قابل اندازه گیری، پاسخ های حرکتی حیوان نسبت به غلظت های مختلف توکسین درجه بندی شد (1 تا 5) و نتایج حاصل آنالیز گردید. نتایج موید آن است که با تبدیل پارامترهای کیفی به کمی می توان واحد فعالیت بیولوژیک سم تیپ A بوتولینوم را تعیین کرد.
| بازنشر اطلاعات | |
 |
این مقاله تحت شرایط Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License قابل بازنشر است. |
