fa کاربرد PCR در تشخیص مایکوباکتریوم توبرکولوزیس کمپلکس پژوهشی Original <p><strong>مقدمه:</strong> تشخیص آزمایشگاهی توبرکولوزیس بر پایه آزمایش مستقیم و کشت می‌باشد. مشکل عمده، زمان‌بر بودن کشت مایکوباکتریوم توبرکولوزیس است. هدف از این مطالعه مقایسه سه روش آزمایشگاهی لام مستقیم، کشت و PCR برای تشخیص توبرکولوز بود. </p><p><strong>روش‌کار:</strong> تعداد 100 نمونه بالینی از مرکز پزشکی ملاهادی سبزواری در اصفهان گردآوری شد.PCR با استفاده از آغازگرهای MT1 وMT2 انجام شد که این آغازگرها DNA تمام سویه‌های مجموعه میکوباکتریوم توبرکولوزیس (میکوباکتریوم توبرکولوزیس، میکوباکتریوم آفریکانوم، میکوباکتریوم میکروتی و میکوباکتریوم بوویس) را تکثیر داد. آغازگرها یک محصول PCR حاوی 225 جفت باز را بوجود آوردند. همچنین یک PCR-ELISA در مورد بعضی از نمونه‌های بالینی انجام شد. محصول PCR از طریق یک شناساگر بیوتنیله شده به استرپتاویدین پوشش داده شده روی چاهک متصل شد و آنگاه به کمک آنتی‌کر دیگوکسیژنین و آنزیم متصل به آن شناسایی شد. </p><p><strong>نتایج:</strong> از 50 فرد گروه کنترل هیچکدام PCR مثبت نداشتند. درحالی‌که در میان 50 فرد بیمار، 48 نفر PCR مثبت و 2 نفر PCR منفی داشتند. بنابراین حساسیت کشت، لام مستقیم و PCR به‌ترتیب 88%، 82% و96% بود. </p><p><strong>نتیجه‌گیری:</strong> با توجه به یافته‌های این تحقیق مشخص می‌شود که حساسیت PCR بیشتر از کشت و لام مستقیم است. </p> <p><strong>Introduction:</strong> Laboratory diagnosis of tuberculosis is based on direct smear and culture, the latter being especially time - consuming. The aim of this study was to compare three laboratory methods for diagnosis of tuberculosis: direct smear, culture and polymerase chain reaction (PCR).</p><p><strong>Methods:</strong> One hundred clinical specimens were collected from Molla-Hadi-Sabzevari health center in Isfahan, Iran. PCR was based on MT1 and MT2 primers common to all species of Mycobacterium tuberculosis complex (M. tuberculosis, M. africanum, M. microti and M. bovis). Primers amplified a 225 bp PCR product. Also a polymerase chain reaction enzyme linked immunoassay (PCR-ELISA) was employed for some of the clinical specimens. The PCR product was the tag in which anti-digoxigenin antibody was bound in the subsequent ELISA. The PCR product was bound to a streptavidin-coated microtitration plate through a biotinylated capture probe. </p><p><strong>Results:</strong> Out of 50 individuals in control group, there was no positive result of PCR. In patient group 48 out of 50 were positive PCR. The sensitivity of the culture, the direct Ziel-Nelson smear and the PCR were %88, %82 and %96, respectively. </p><p><strong>Conclusion:</strong> According the results of this study it is concluded that PCR is more sensitive than culture and direct smear. </p><p></p><p><strong>Hakim Research Journal 9(1):16-21. </strong></p> PCR، مایکو باکتریوم توبرکولوزیس، تشخیص. PCR , Mycobacterium tuberculosis, diagnosis. 16 21 http://hakim.tums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-1-339&slc_lang=fa&sid=1 Shirani D,(MSc) داریوش شیرانی No Golbang N,(PhD). دکتر ناصر گلبانگ agolbang@yahoo.com Yes